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AUTORIA: Leonardo Maia Leony
ORIENTAÇÃO: Fred Luciano Neves Santos
TÍTULO DA TESE: “AVALIAÇÃO E VALIDAÇÃO DO POTENCIAL DIAGNÓSTICO DE PROTEÍNAS QUIMÉRICAS DO TRYPANOSSOMA CRUZI PARA DETECÇÃO DA DOENÇA DE CHAGAS EM CÃES”.
PROGRAMA: Pós-Graduação em Biotecnologia em Saúde e Medicina Investigativa
DATA DE DEFESA: 21/05/2019
RESUMO
INTRODUÇÃO: Os cães são considerados um grupo sentinela para doença de Chagas (DC) devido ao seu papel na manutenção do ciclo de transmissão em ambientes domésticos e sua correlação com a prevalência da DC humana. O ELISA é geralmente a metodologia escolhida para o diagnóstico destes animais, no entanto, seu desempenho depende da matriz antigênica empregada. Uma estratégia para ultrapassar esta limitação é baseia-se na utilização de antígenos recombinantes quiméricos, compostos por sequências peptídicas conservadas e repetitivas de diversas proteínas do parasita. Nosso grupo desenvolveu quatro antígenos quiméricos (IBMP-8.1, 8.2, 8.3 e 8.4) e seu potencial diagnóstico foi avaliado para o diagnóstico da DC humana, mostrando desempenho diagnóstico superior em comparação aos dos testes comercialmente disponíveis no Brasil, Espanha e Argentina.
OBJETIVO: Este estudo teve como objetivo avaliar o potencial diagnóstico dos antígenos IBMP frente às amostras de cães naturalmente e experimentalmente infectados pelo Trypanosoma cruzi.
MATERIAIS E MÉTODOS: Os ensaios foram otimizados por checkerboard titration. Posteriormente, o potencial diagnóstico foi validado através de curvas ROC e o desempenho dos testes foi determinado utilizando tabelas de dupla entrada. A reatividade cruzada também foi avaliada para babesiose, erliquiose, dirofilariose, anaplasmose e leishmaniose.
RESULTADOS: Todos os antígenos quiméricos demonstraram um alto desempenho diagnóstico, especialmente o IBMP-8.3 e IBMP-8.4. O antígeno IBMP-8.3 demonstrou uma sensibilidade de 100%, seguido pelo IBMP-8.4 (96,7-100%), IBMP-8.2 (73,3-87,5%) e IBMP-8.1 (50-100%). As especificidades mais elevadas dos antígenos foram para o IBMP-8.2 (100%) e IBMP-8.4 (100%), seguido por IBMP-8.3 (96,7-97,5%) e IBMP 8.1 (89,1-100%).
CONCLUSÕES: O uso dos antígenos quiméricos IBMP em imunoensaios para diagnosticar a DC em cães é uma ferramenta promissora para fins veterinários e epidemiológicos, consistindo em uma alternativa para contornar os problemas comuns observados no diagnóstico sorológico de CD, como a variação dos parâmetros de desempenho de acordo com a cepa do parasita e reatividade cruzada com outras doenças infecto-parasitárias.
Palavras-chave: ELISA, doença de Chagas, cães, Trypanosoma cruzi, antígenos recombinantes quiméricos.
