Estudante: Kaio Jefté Santos de Oliveira Dias Caldeira de Andrade
Orientação: Jaime Ribeiro Filho
Título da Dissertação: “Heme induz ativação de leucócitos e modula o metabolismo de eicosanoides em modelo murino de anemia falciforme”
Programa: Pós-Graduação em Patologia Humana e Experimental
Data de defesa: 27/09/2023
Horário: 14h00
Local: Sala Virtual do Zoom
ID da reunião: 812 3375 6844
Senha de acesso: defesa

Resumo

INTRODUÇÃO: O termo Doença falciforme (DF) designa um conjunto de doenças hereditárias caracterizadas por mutações no gene que codifica a subunidade β da hemoglobina (HBB), dentre as quais a AF se destaca como um problema de saúde pública mundial em termos de incidência, prevalência e morbimortalidade. Evidências demonstram que a AF é caracterizada por uma reposta inflamatória estéril causada principalmente por produtos de hemácias falciformes, tais como o heme. Embora seja conhecido que o heme atue como um estímulo inflamatório em modelos in vivo e in vitro, o seu papel no metabolismo lipídico na doença falciforme ainda é pouco compreendido. OBJETIVO: Avaliar o efeito do heme no recrutamento de leucócitos e metabolismo de eicosanóides em modelo murino de anemia
falciforme. MATERIAIS E MÉTODOS: Camundongos transgênicos para a anemia falciformes (n=6/grupo) dos genótipos AA (saudáveis) e SS (falciformes) foram desafiados por via intrapleural com solução de hemina. Seis hotas após o desafios, os animais foram eutaziados e o lavado pleural e o pulmão foram coletados. A contagem total e diferencial de leucócitos do lavado foi realizada por microscopia. Células coradas com oil red O foram analizadas quanto ao número de corúsculos lipídicos por microscopia. A expressão gênica em células do lavado foi realizada por PCR e a dosagem de eicosanoides no sobrenadante foi realizada por ensaio imunoenzimático. A inflamação pulmonar foi avaliada por imunohistoquímica. RESULTADOS: O desafio com heme aumentou o número de neutrófilos e o conteúdo lipídico de leucócitos do lavado pleural em em animais de ambos os fenótipos, demonstrando indicando ser um estímulo para recrutamento e ativaçção de leucócitos. O heme induziu um aumento na expressão relativa dos genes de COX-1 e PLA2 apenas em camundongos falciformes que, curiosamente, apresentaram menores níveis de LTB4. Por fim, camundongos falciformes apresentaram maior inflamação pulmonar, que foi pouco afetada pelo heme. CONCLUSÃO: O desafio com heme estimulou o recrutamento e ativação de leucócitos em camundongos saudáveis e falciformes. No entanto, apenas camundongos falciformes estimulados com heme apresentam maior expressão gênica de enzimas produtoras de eicosanoides, indicando alterações no metabolismo de eicosanoides em camundongos falciformes são diretamente rlacionadas com a ação do heme, in vitro, o que é corroborado pela observação de desequilíbrio na produção de PGE2 e LTB4 nesse modelo experimental. Em perspectiva, esses achados contribuirão para estabelecer modelos animais para o estudo de novas abordagens terapêuticas em doenças inflamtórias hemolíticas como a anemia falciforme. Palavras-chave: Anemia falciforme. Inflamação. Corpúsculos lipídicos. Heme. Modelo murino.

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