Biblioteca realiza curso sobre Estratégias de Busca no PubMed

Curso-pubmedO programa Treinamentos Continuados da Biblioteca de Ciências Biomédicas Eurydice Pires de Sant’Anna, da Fiocruz Bahia, oferece mais uma edição do curso sobre Estratégias de Busca no PubMed, no dia 17 de junho, das 15h às 17h, na sala de aula da Biblioteca.

Ensinar o aluno a explorar e utilizar de forma avançada o PubMed, manejar o MeSH, e mostrar estratégias eficientes e técnicas para busca de informação científica e revisões sistemáticas; são os objetivos do curso. Interessados deverão se inscrever pelo e-mail biblioteca@bahia.fiocruz.br, informando nome da instituição, setor, e-mail e telefones para contato. As vagas são limitadas.

Serviço:

Curso Estratégias de Busca no PubMed
Data: 17/06/2016
Horário: das 15h às 17h
Local: sala de aula da biblioteca da Fiocruz Bahia – Rua Waldemar Falcão, 121, Candeal – Salvador/BA

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Inscrição para seleção de Pós-Doutorado encerra dia 17/06

Interessados em participar da seleção de pós-doutorado pelo programa de Pós-graduação em Biotecnologia em Saúde e Medicina Investigativa (PGBSMI) têm até o dia 17 de junho para se inscrever. Os candidatos devem possuir título de doutor, currículo atualizado na Plataforma Lattes do CNPq, não ser aposentado. As propostas devem ser alinhadas a uma das quatro áreas de concentração do programa.

Clique aqui para acessar o edital.

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Projeto itinerante realiza mapeamento genômico do vírus Zika

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O Zika in Brasil Real Time Analysis (ZIBRA), projeto que passa por seis cidades da região Nordeste com um laboratório móvel de análise genômica, para realizar pesquisa sobre epidemiologia molecular do vírus Zika, chega a Salvador no próximo domingo (12/06). Resultado da parceria entre Fiocruz Bahia, Instituto Evandro Chagas, Ministério da Saúde e universidades do Reino Unido, Canadá e Austrália, o objetivo do Zibra é ampliar o mapeamento genômico do vírus, para determinar a origem, sua diversidade genética, e a epidemiologia da doença, ajudando no combate à epidemia durante uma emergência de saúde pública.

Os pesquisadores partiram de Natal (RN), no dia 03 de junho, passaram por João Pessoa (PB) e seguiram para Recife (PE). O projeto tem parada ainda em Aracaju (SE) e Feira de Santana (BA), antes de chegar à capita baiana, que terá a Fiocruz Bahia como ponto final das análises. Os pesquisadores dispõem de um laboratório adaptado em um ônibus, que transporta a equipe e os materiais. O que torna a experiência possível é o uso do Oxford Nanopore MinION device, um sequenciador de DNA de última geração, com peso de apenas 100g, podendo ser carregado por USB de um computador portátil. O equipamento é capaz de sequenciar 12 amostras simultaneamente em seis horas.

Inspirado na experiência da análise genômica do Ebola na África, durante o surto de 2014-2015, o ZIBRA pretende sequenciar 750 cepas do Zika, levando em consideração os fatores geográficos e regionais da área do país mais afetada pela doença. Também serão incluídas amostras históricas e de pacientes com diferentes apresentações clínicas. A meta é identificar como e quando o Zika foi introduzido no país, além de apontar “o padrão e determinantes da disseminação por todo o país e localidades vizinhas, a extensão da diversidade genética (de importância para a vacina e design de diagnóstico), e se há existem associações entre as mudanças no genoma do vírus e a probabilidade de complicações ZIKV como microcefalia”.

O Brasil está sofrendo uma grande epidemia do vírus Zika. Além das manifestações clínicas da doença, têm-se evidências que o mesmo está relacionado com o aumento exponencial do número de casos de microcefalia em recém nascidos e a síndrome de Guillain- Barré. O pesquisador da Fiocruz Bahia, Luiz Alcântara, explicou que o vírus encontrado no Brasil guarda diferenças entre o encontrado na Ásia, contando ainda com a questão do hospedeiro e das diferenças biológicas.

“O projeto é importante não só para a geração de novas sequências do vírus ZIKA, mas também para identificarmos a necessidade de melhor orientação no diagnóstico molecular. Nos Laboratórios Centrais (Lacens), que passamos até o momento, o número de amostras positivas não passavam de 1% no universo já analisado. Nós estamos tendo em torno de 10%, confirmados pelo sequenciamento imediato”, avaliou Alcântara.

No dia 17/06, a partir das 9h, haverá um Simpósio sobre Zika, no auditório da Fiocruz Bahia.

Clique aqui e confira a programação.

Clique aqui e acesse o site do ZIBRA.

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Tese avalia tratamento em pacientes com hepatite crônica

AUTORA: PACHECO, Sidelcina Rugieri.
ORIENTADOR: SILVA, Luciano Kalabric.
TÍTULO DA TESE: Avaliação de mutações de resistência ao tratamento com análogos de nucleo(t)ídeos e de escape vacinal do vírus da hepatite B (VHB) em pacientes com hepatite crônica.150 f.il.
PROGRAMA: Doutorado em Biotecnologia em Saúde e Medicina Investigativa – Instituto Gonçalo Moniz, Fundação Oswaldo Cruz.
DATA DE DEFESA: 15/04/2016

RESUMO

 

INTRODUÇÃO: A hepatite B (VHB) é uma infecção dinâmica crônica, que apesar de existir programas de imunização e tratamento antiviral disponível, existe o risco de emergência de mutações de resistência aos análogos de núcleos(t)ídeos (AN) que devem ser rastreadas, devido as suas implicações clínicas. O Brasil disponibiliza pelo SUS cinco drogas para o tratamento antiviral: IFN, LAM, ADF, ETV e TDF e um guia de conduta clínica para orientar o tratamento no território nacional, o Protocolo de Diretrizes Terapêuticas para Hepatite B e co-infecções.

OBJETIVO: O objetivo do presente estudo foi avaliar as mutações de resistência aos AN, mutações de escape vacinal e genótipos circulantes em pacientes com hepatite B crônica em dois centros de referência em Hepatites, na Bahia (região Nordeste) e no Acre (região Norte) do Brasil.

MATERIAL E MÉTODOS: Foi utilizada ferramentas de biologia molecular e bioinformática, através de nested PCR e sequenciamento direto das amostras, para rastrear as mutações de resistência, a região alvo foi a transcriptase reversa (RT) do gene P e as mutações de escape vacinal foi a região do gene S do VHB, como também os genótipos e subgenotipos do VHB.

RESULTADOS: Foram incluídos 527 pacientes durante o período de 2011-2015, sendo 320 pacientes do HUPES/BA e 207 do FUNDHACRE/AC. Os pacientes que representam a região Nordeste foram 59,3 % do sexo masculino e uma média de idade de 44,75±12,4 DP, os pacientes da região Norte 42% foram do sexo masculino e a média de idade foi de 40,36±13,9 DP. Todos os pacientes incluídos apresentaram AgHBs persistente por mais de seis meses e 86,1% apresentaram AgHBe negativo. Foram sequenciadas 296 amostras dos pacientes com VHB crônica. Foram encontradas mutações de resistência aos AN na Região Norte 1,2% (2), Região Nordeste 7,4%(8) e no global 3,8%(20). Os padrões de mutações de resistência primária encontrados foram: rtA194T, (3) rtL180M+M204V, rtL180M+M204I, rtS202I, rtM204I, rtA181S, rtA181E e rtA184S. Em relação ao escape vacinal a frequência para a Região Norte foi de 7,1% (11), Região Nordeste 8,4% (9) e no global 7,6% (20). Nos pacientes virgens  de tratamento (n=189), a frequência de mutações de resistência foi de 6%, somente nas amostras da região Nordeste. Não houve diferença estatisticamente significante entre o grupo com ou sem mutação dos pacientes virgens de tratamento. Não foram encontradas mutações de resistência nas amostras da região Norte.  Os genótipos circulantes nas duas regiões foram A, D e F, e a região Nordeste foi encontrada o genótipo C (C2).

CONCLUSÃO: Os resultados demonstram a importância de rastrear e monitorar as mutações de resistência aos AN e de escape vacinal devido à importância epidemiológica e clínica na conduta terapêutica.

Palavras-chave: VHB, Vírus da Hepatite B, Mutações de Resistência, Escape Vacinal, Análogos de Núcleos(T)ídeos

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Produzir o receptor de IL-10 recombinante para estudos de imunomodulação em cães é objetivo de dissertação

AUTORA: SANTOS, Catiule de Oliveira.
ORIENTADOR: OLIVEIRA, Geraldo Gileno de Sá.
TÍTULO DA DISSERTAÇÃO: Produção e avaliação do receptor solúvel de IL-10 canina recombinante (rcasIL-10R1)
PROGRAMA: Mestrado em Biotecnologia em Saúde e Medicina Investigativa – Instituto Gonçalo Moniz, Fundação Oswaldo Cruz.
DATA DE DEFESA: 17/03/2016

RESUMO

 

INTRODUÇÃO: A interleucina 10 (IL-10) é uma importante citocina anti-inflamatória e imunossupressora que é produzida por uma variedade de células do sistema imune, incluindo linfócitos T e B, células monocíticas, células Natural Killer, células dendríticas, eosinófilos e neutrófilos. O receptor de IL-10 é composto por duas cadeias polipeptídicas denominadas IL- 10R1 e IL-10R2. A cadeia IL-10R1 exibe alta afinidade por IL-10 e é responsável pela ligação inicial com a citocina. Depois da ligação entre a IL-10 e a cadeia IL-10R1, a cadeia IL-10R2 se junta ao complexo protéico formado e é realizada a sinalização para o citoplasma da célula alvo. Existem evidências de que a IL-10 participa na susceptibilidade de seres humanos e cães a leishmaniose visceral. Além disso, a imunização de animais com antígenos e o bloqueio concomitante da sinalização por IL-10 pode favorecer a indução de respostas imunes celulares (Th1), úteis no combate a infecções por patógenos intracelulares.

OBJETIVO: O objetivo do presente projeto foi produzir o receptor solúvel de IL-10 (domínio extracitoplasmático da cadeia IL-10R1, com atividade antagonista) recombinante (rcasIL-10R1), visando estudos futuros de imunomodulação em cães.

METODOLOGIA: Para isso, foram realizadas as seguintes etapas: 1) obtenção de uma construção de DNA codificante de rcasIL-10R1 em um cromossoma artificial de baculovírus desprovido dos genes da catepsina e chitinase, 2) transfecção de células de insetos, obtenção de partículas virais e titulação viral (P1), 3) amplificação e titulação viral (P2), 4) ensaio de otimização para expressão da proteína recombinante em células High five; 5) produção da proteína recombinante em celulas High five e purificação por cromatografia de afinidade e 6) avaliação da capacidade de rcasIL-10R1 bloquear a sinalização de IL-10, utilizando-se células MC/9.

RESULTADOS: A julgar pelo sequenciamento de DNA do inserto na construção plasmídeal carreadora (pFastBac1-GP64-casIL-10R1) e da amplificação por PCR do segmento de DNA contendo o inserto no cromossoma artificial do baculovírus, a obtenção de baculovírus recombinante codificando casIL-10R1 foi realizada com sucesso. O ensaio de otimização da produção da rcasIL-10R1 realizado com células de inseto da linhagem High Five mostrou as melhores condições para foram multiplicidade de infecção (MOI) 5 e tempo de infecção (TOI) de 72h. A proteína recombinante produzida e purificada mostrou uma banda principal de 42 kDa pela análise por eletroforese em gel de poliacrilamida e o rendimento foi de 2,8 mg por litro de cultura. O ensaio realizado com células MC/9 cultivadas na presença de IL-4 e IL-10 com ou sem rcasIL-10R1 mostrou que a proteína recombinante produzida inibiu parcialmente a proliferação das células, sugerindo o bloqueio da sinalização através de IL-10.

CONCLUSÕES: Portanto, no presente trabalho rcasIL-10R1 com capacidade de bloquear a sinalização por IL-10 foi produzido com sucesso, abrindo a perspectiva de futuros estudos de imunomodulação em cães.

Palavras-chave: Interleucina 10, Receptor solúvel de IL-10 canina, Baculovírus, Células MC/9.

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Dissertação avalia fatores associados a cintura hipertrigliceridêmica no ELSA

AUTORA: FREITAS, Roberta Souza.
ORIENTADOR: ALMEIDA, Maria da Conceição Chagas de.
TÍTULO DA DISSERTAÇÃO: Fatores associados a cintura hipertrigliceridêmica no Estado Longitudinal de Saúde do Adulto (ELSA-Brasil)
PROGRAMA: Mestrado em Biotecnologia em Saúde e Medicina Investigativa – Instituto Gonçalo Moniz, Fundação Oswaldo Cruz.
DATA DE DEFESA: 18/03/2016

RESUMO

 

OBJETIVO: Estimar a prevalência de cintura hipertrigliceridêmica (CH) dos participantes do Estudo Longitudinal da Saúde do Adulto (ELSA-Brasil), identificar fatores associados à CH e comparar com outros indicadores de risco cardiovascular e metabólico.

MÉTODOS: Dados da linha de base de uma coorte composta por servidores públicos. O fenótipo CH é definido pela presença simultânea de circunferência da cintura (CC) aumentada e hipertrigliceridemia em jejum. O indicador foi construído segundo pontos de corte da CC definidos pelo National Cholesterol Education Program (NCEP) e International Diabetes Federation (IDF). A associação entre as variáveis independentes e CH foi testada por meio de modelos de regressão logística multivariada. A CH foi comparada também com outros indicadores de risco cardiovascular e metabólico por meio de testes de correlação, índice Kappa, sensibilidade e especificidade.

RESULTADOS: Foram avaliados 12.811 funcionários, 54,2% do sexo feminino, a prevalência da CH-IDF foi de 24,7% e a da CH-NCEP de 13,3%. CH foi associado a consumir álcool de modo excessivo, ser ex-fumante, ter hipertensão, diabetes, HDL baixo, não-HDL alto e PCR aumentado, independente do sexo ou critério de definição. A CH também foi associada a auto percepção negativa do estado de saúde entre homens e mulheres classificadas por meio do critério NCEP; a prática de atividade física no tempo livre entre homens; a união atual ou passada entre mulheres com classificação de CH-IDF; e a cor/raça branca e ter seguro de saúde com CH-NCEP no sexo masculino. A síndrome metabólica apresentou maior correlação com CH entre os participantes de ambos os sexos.

CONCLUSÕES: Em decorrência de suas associações e da correlação com síndrome metabólica, o indicador CH pode ser utilizado como ferramenta de triagem para indivíduos com risco cardiometabólico na prática clínica.

Palavras-chave: Cintura Hipertrigliceridêmica; Doenças Cardiovasculares; Doenças Metabólicas; Fatores de Risco.

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Produção IL-7 canina no sistema baculovírus-células de inseto é tema de dissertação

AUTORA: OLIVEIRA, Barbara Maria Nascimento de.
ORIENTADOR: OLIVEIRA, Geraldo Gileno de Sá.
TÍTULO DA DISSERTAÇÃO: Produção IL-7 canina no sistema baculovírus-células de inseto.
PROGRAMA: Mestrado em Biotecnologia em Saúde e Medicina Investigativa – Instituto Gonçalo Moniz, Fundação Oswaldo Cruz.
DATA DE DEFESA: 21/03/2016

 

RESUMO

 

INTRODUÇÃO: A interleucina 7 (IL-7) é uma citocina pleiotrópica produzida principalmente por células estromais da medula óssea, células epiteliais tímicas e intestinais. IL-7 e que promove o desenvolvimento de linfócitos T e B e diferenciação de células T memória, especialmente CD4+. Por isso, diversos autores têm estudado a capacidade de IL-7 promover a restauração da população de linfócitos em situações de linfopenia e resposta imune de memória. Cães que desenvolvem leishmaniose visceral e recebem tratamento específico apresentam cura clínica. No entanto, após a interrupção do tratamento, a maioria dos animais exibe recaída da doença, mesmo na ausência de reinfecção. É possível que esse fenômeno esteja associado a uma dificuldade de estabelecimento de linfócitos T de memória específicos para Leishmania em cães. Em nosso laboratório, tentativas prévias foram realizadas para produzir a IL-7 canina em Escherichia coli, no entanto, o rendimento da proteína biologicamente ativa foi pequeno.

OBJETIVO: Por isso, resolveu-se avaliar a viabilidade de produzir IL-7 do sistema baculovírus-células de inseto.

MATERIAL E MÉTODOS: No presente trabalho, uma construção de DNA foi concebida contendo uma sequência de nucleotídeos que codificam o peptídeo sinal da proteína GP64 do baculovírus da Autographa californica (AcMNPV), a IL-7 canina (proteína madura) com códons otimizados para a tradução em Trichoplusia ni, um espaçador com 23 aminoácidos e uma cauda de seis histidinas. A construção de DNA elaborada foi sintetizada quimicamente, inserida em um plasmídeo de clonagem (pUC57-GP64caIL-7), subclonada em um plasmídeo carregador (pFastBac1- GP64caIL-7), adequado para o sistema baculovirus-célula de inseto, e transferida para o cromossoma artificial do baculovírus recombinante (bacmídeo).

RESULTADOS: A produção de IL-7 recombinante canina (rcaIL-7) em células de inseto infectadas com baculovírus recombinante foi otimizada. Em seguida, a rcaIL-7 foi produzida em células High-five cultivadas em suspensão utilizando multiplicidade de infecção (MOI) de 5 e tempo de infecção (TOI) de 48 h. A proteína recombinante foi purificada por cromatografia de afinidade em Sepharose-níquel, obtendo-se um rendimento médio de 5,5 mg por litro de cultivo.

CONCLUSÃO: RcaIL-7 purificada, avaliada a 40 ng/mL, mostrou-se capaz de promover a proliferação de células mononucleares de sangue periférico de cães sadios, sem estímulo prévio ou concomitante, indicando que a proteína foi produzida biologicamente ativa. Futuros estudos serão realizados para avaliar a capacidade imunomoduladora da rcaIL-7 em cães e determinar a utilidade dessa citocinas no tratamento de enfermidades caninas, como por exemplo, na leishmaniose visceral canina.

Palavras-chave: Interleucina 7; células mononucleares; cão.

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Vacina contra Leishmaniose Visceral é tema de dissertação

AUTORA: MENDES, Jéssica Mariane Ferreira.
ORIENTADOR: OLIVEIRA, Geraldo Gileno de Sá.
TÍTULO DA DISSERTAÇÃO: Produção e Avaliação de Antígenos Recombinantes candidatos a compor uma vacina contra Leishmaniose Visceral.
PROGRAMA: Mestrado em Biotecnologia em Saúde e Medicina Investigativa – Instituto Gonçalo Moniz, Fundação Oswaldo Cruz.
DATA DE DEFESA: 01/02/2016

RESUMO

 

INTRODUÇÃO: Uma vacina efetiva contra a leishmaniose visceral (LV) canina pode contribuir para o controle da doença no homem. Visando o desenvolvimento de uma vacina contra LV canina, antígenos recombinantes de L. infantum foram selecionados em nosso laboratório pelo uso de uma mistura de soros de seres humanos ou cães naturalmente infectados pela L. infantum. Alguns destes antígenos foram testados em diversos protocolos de imunização, incluindo uso de diferentes adjuvantes, em camundongos ou cães. A imunização de camundongos ou cães com um dos antígenos recombinantes (rLci2B) usado isoladamente ou em associação com saponina induziu resposta imune Th2 ou Th1/Th2, respectivamente, não protetoras contra a infecção experimental. Com a determinação da sequência deduzida de aminoácidos notou-se que a maioria dos antígenos selecionados apresenta um segmento com sequência de aminoácidos única (domínio não repetitivo) e segmentos com sequência de aminoácidos com motivos repetitivos (domínios repetitivos). Possivelmente a incapacidade dos antígenos recombinantes de induzir uma resposta imune predominantemente Th1, protetora contra a LV, seria por conta da presença de domínios repetitivos, que favorecem a apresentação antigênica por linfócitos B e, consequentemente, estimulam uma resposta imune Th2. Para avaliar o direcionamento da resposta imune pelos dois tipos de domínio, novas construções de DNA foram concebidas de modo a codificar apenas domínio(s) não repetitivo(s) ou domínio(s) não repetitivo(s) e domínios repetitivos.

OBJETIVOS: Produzir quatro proteínas recombinantes com domínios não repetitivos (rLci2-NT-CT, rLci3-NT-CT, rLci10-NT e rLci12-NT-CT) e avaliar a capacidade desses polipeptídios de induzir resposta imune celular in vitro em cães assintomáticos inoculados por via dérmica com L. infantum.

MATERIAIS E MÉTODOS: Foram realizadas: a) a subclonagem de construções de DNA (Lci3-NT-CT, Lci10-NT e Lci12- NT-CT) em um plasmídeo apropriado para expressão em Escherichia coli, b) a determinação de condições apropriadas para produção das proteínas recombinantes (rLci2-NT-5R-CT, rLci2-NT-CT, rLci3-NT-2R-CT, rLci3-NT-CT, rLci10-NT-2R e rLci10- NT) c) a purificação das proteínas recombinantes por cromatografia de afinidade e d) avaliação da capacidade dos polipeptídios de induzir estimulação de células mononucleares sangue periférico (PBMC) de cães assintomáticos inoculados por via dérmica com L. infantum.

RESULTADOS: Três (rLci2-NT-CT, rLci2-NT-5R-CT, rLci3- NT-CT, rLci3-NT-2R-CT, rLci10-NT e rLci10-NT-2R) dos quatro pares de polipeptídios recombinantes foram expressos, produzidos e purificados. Três antígenos recombinantes (rLci2-NT-5R-CT, rLci2-NT-CT e rLci3-NT-2R-CT) promoveram a linfoproliferação in vitro utilizando PBMC de cães assintomáticos inoculados por via dérmica com L. infantum

CONCLUSÕES: Três das seis proteínas produzidas induziram a linfoproliferação, sendo a maior linfoproliferação encontrada para PBMC estimulado com a proteína sem domínios repetitivos (rLci2-NT-CT). Avaliações adicionais são necessárias para comprovar a utilidade destas moléculas em formulação de vacina contra leishmaniose visceral canina.

Palavras-chave: Leishmaniose visceral, Cão, Proteínas recombinantes, Vacina.

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