Autoria: Sara Nunes de Oliveira Araújo
Orientação: Natalia Machado Tavares
Título da tese: O papel funcional do miR-193b e miR-205 na exposição in vitro de diferentes células humanas à Leishmania braziliensis
Programa: Pós-Graduação em Patologia Humana e Experimental
Data de defesa: 28/01/2022
Horário: 09h00
Local: Sala virtual do Zoom

RESUMO

As leishmanioses estão entre as enfermidades mais negligenciadas no mundo, afetando as populações mais pobres, principalmente em países em desenvolvimento. A leishmaniose cutânea (LC) é a forma mais frequente dessa doença, caracterizada por lesão(s) cutânea(s) ulceradas(s) com uma inflamação crônica descontrolada. Os mecanismos moleculares associados a regulações pós-transcricionais e a imunopatogênese da LC permanecem pouco compreendidos. Os microRNAs (miRNAs), pequenos RNAs endógenos não codificantes, surgiram nos últimos anos como moléculas-chave na regulação da expressão gênica. Dados do nosso grupo mostraram que o miR-193b, miR-671 e seus alvos estão fortemente correlacionados com o tempo de cura dos pacientes com LC. Estes achados sugerem que este eixo pode desempenhar um papel importante na LC, além de serem candidatos potenciais para o desenvolvimento de novas ferramentas para a doença. Além disso, comparamos o perfil de expressão de miRNAs com outras doenças inflamatórias de pele, onde apenas o miR-205 foi
encontrado com a expressão significativamente inibida em todas as doenças. Diante dessas evidências, este estudo avaliou o papel funcional dos miR-193b e miR-205 na exposição in vitro de diferentes células humanas à Leishmania braziliensis (Lb). No primeiro capítulo, investigamos o perfil de expressão do miR-193b na infecção por Lb em macrófagos humanos in vitro. Inicialmente, análises de predição in silico sugeriram que esse miRNA tem o TREM1, TLR4, TNFRSF1B, CCR7, CD40 e STAT5 como alvos potenciais. Também foi possível validar a expressão desses alvos em novas biópsias de pacientes com LC e apenas a STAT5 não apresentou diferença estatística. Posteriormente, os ensaios com macrófagos infectados por Lb mostraram que a exposição por 30 minutos ou 4 horas reduz significativamente a expressão do miR-193b. Em contrapartida, a expressão do TREM1 foi significativamente aumentada nos dois tempos de infecção, diferente dos demais alvos que não apresentaram uma diferença estatística no perfil de expressão. Com o intuito de avaliar o papel funcional desse miRNA, macrófagos foram transfectados com miR-193b e infectados por Lb por 4 e 12 horas. Não foram observadas alterações nos potenciais alvos ou mediadores inflamatórios. No entanto, após 12 horas, houve redução na taxa de infecção e carga parasitária, sugerindo que este miRNA tem papel no controle da infecção. No segundo capítulo, validamos o perfil de expressão do miR205 em novas biópsias de pacientes com LC. Análises in silico mostraram os alvos do miR205, tanto na LC quanto nas demais doenças, e os resultados indicam que há uma especificidade dos alvos para cada doença avaliada. Sendo assim, validamos os dois genes alvo mais modulados na LC: SULF1 e o IRF1. Ambos, significativamente aumentados nas biópsias, confirmando os resultados das análises. Considerando que os queratinócitos desempenham um papel fundamental na regulação da inflamação da pele, avaliamos a expressão desse miRNA em queratinócitos humanos imortalizados (HaCats) expostos a Lb por 4 ou 24 horas, diante de lesões mecânicas. Os dados sugerem que, independente das lesões, a exposição das HaCats à Lb reduz a expressão desse miRNA. Nas HaCats transfectadas com o miRNA e expostas a Lb não foram observadas alterações na expressão dos alvos preditos, mediadores inflamatórios ou proliferação celular. No entanto, o miR-205 regulou a migração dessas células, uma vez que o percentual de fechamento de lesão no ensaio in vitro foi maior nos grupos transfectados com esse miRNA e menor com a exposição a Lb. Esses dados mostraram que a regulação negativa do miR-205 pode ser um fenômeno comum em doenças inflamatórias de pele, independente da sua etiologia, podendo atuar em processos básicos da biologia da pele e influenciando a cicatrização. Sendo assim, o miR-205 pode ser considerado um candidato promissor para aplicação na prática clínica. Em conjunto, essas análises demonstram o potencial desses dois miRNAs na LC, podendo atuar desde processos iniciais da inflamação até o processo de cicatrização da lesão.

Palavras-chave: Leishmania braziliensis, microRNA, macrófagos, queratinócitos

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Autoria: Camila Freitas Chaves
Orientação: Luciano Kalabric Silva
Título da dissertação: EPIDEMIOLOGIA DA ESQUISTOSSOMOSE EM UMA ÁREA URBANA DA CIDADE DE SALVADOR-BA
Programa: Pós-Graduação em em Biotecnologia em Saúde e Medicina Investigativa
Data de defesa: 28/01/2022
Horário: 14h00
Local: Sala virtual do Zoom

RESUMO

INTRODUÇÃO: No Brasil, apesar da diminuição na intensidade da migração rural-urbana, a população urbana continua crescendo constantemente. Isso, combinado a outros fatores, promove a urbanização acelerada e desordenada, levando ao surgimento de áreas com precárias condições de moradia e saneamento, e a disseminação e persistência da esquistossomose em áreas urbanas. OBJETIVO: O objetivo deste estudo foi descrever e explicar a distribuição da esquistossomose em uma área urbana da cidade de Salvador-BA, Brasil. MATERIAL E MÉTODOS: Em 2019, quatro pontos ao longo do rio do Cobre e um ponto no riacho vizinho foram selecionados para confirmar a presença de Biomphalaria sp. e avaliar a contaminação fecal de coleções hídricas pelo método Coliscan Easygel®. Um estudo de corte-transversal foi conduzido na comunidade com coleta de dados e amostras. Foi realizado um inquérito sociodemográfico e coletadas até três amostras de fezes em dias diferentes para diagnóstico de Schistosoma mansoni com Kato-Katz. As amostras positivas foram purificadas e genotipadas utilizando 15 marcadores microssatélites RESULTADOS: Dos cinco pontos de coleta de água, quatro apresentaram contaminação fecal e dois, a presença de Biomphalaria sp. Participaram dos inquéritos epidemiológico e parasitológico 1.134 residentes. A média de idade foi de 33,6 anos (21,0 DP), a maioria era do sexo feminino (59%). Testaram positivos para S. mansoni 62 participantes (5,5%), com uma carga parasitária média baixa (88,5 opg). Estão associadas a infecção S. mansoni as variáveis sexo masculino, idade maior que 20 anos, contato com água, frequência e duração do contato e tipos de contato relacionados a recreação. Os índices de diferenciação das infrapopulações (Di) e das infrapopulações sobre a população componente (Dic) foram ambos moderados. O tamanho da população efetivo (Ne) foi de 38.197, que é um número imensurável para nossos computadores. CONCLUSÃO: O bairro de Pirajá possui as condições ideias para a persistência e disseminação da esquistossomose e representa uma área de transmissão local em Salvador-BA. Pela grande relevância cultural e histórica do bairro, Pirajá precisa de uma intervenção infraestrutural tanto para auxiliar no controle da esquistossomose, quanto pela saúde do ambiente local. Palavras-chave: esquistossomose urbana, Schistosoma mansoni, saneamento básico.

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Autoria: Ana Lucia Galvão Sales
Orientação: Deborah B. Mothé Fraga
Título da dissertação: “ESTUDO EPIDEMIOLÓGICO DA ESPOROTRICOSE NO MUNICÍPIO DE SALVADOR – BA”
Programa: Pós-Graduação em em Biotecnologia em Saúde e Medicina Investigativa
Data de defesa: 19/01/2022
Horário: 09h00
Local: Sala virtual do Zoom

RESUMO

Introdução: Apesar de ser uma doença negligenciada, a esporotricose é a micose subcutânea mais frequente no Brasil e uma das mais relevantes para a saúde pública, em especial nas últimas duas décadas. A ocorrência da esporotricose em humanos esteve associada por muito tempo à transmissão sapronótica decorrente da implantação traumática do fungo Sporothrix spp. a partir do ambiente contaminado, principalmente em atividades de jardinagem e horticultura. Porém atualmente tem-se observado sobretudo no Brasil, a emergência da esporotricose zoonótica, tendo o gato como animal mais envolvido nesse ciclo. O agente etiológico da esporotricose é o fungo termodimórfico do gênero Sporothrix. O potencial zoonótico da esporotricose foi reforçado pelo isolamento de Sporothrix spp. nas lesões de gatos. Sua ocorrência já foi registrada nos EUA, México, Peru, Colômbia, Argentina, Paraguai, Malásia, Espanha, Alemanha, Austrália, Japão, Tailândia, Reino Unido e Brasil. A infecção ocorre principalmente por meio de arranhões, mordidas ou contato com o exsudato de lesões cutâneas devido à alta carga de leveduras nos felinos infectados. Objetivo: Descrever a ocorrência e distribuição da esporotricose no município de Salvador – BA nos anos de 2018 e 2019. Método: O estudo foi realizado no município de Salvador, capital do estado da Bahia. Foram incluídos neste estudo animais suspeitos de esporotricose em Salvador oriundos de vigilância passiva e/ou ativa realizadas em 2018 e 2019 pelo Centro de Controle de Zoonoses da Secretaria Municipal de Saúde, captados após a confirmação dos primeiros casos. Os dados clínico-epidemiológicos foram coletados por questionário utilizado pela equipe de médicas veterinárias que realizaram a avaliação dos animais no domicílio dos mesmos. Resultados: Em Salvador, nos anos de 2018 e 2019, ocorreram 1.290 notificações de animais suspeitos para esporotricose, sendo que 87,6% eram da espécie felina, 65,0% dos animais avaliados eram machos, 95,8% não possuíam raça definida (SRD), 53,3% eram adultos, 75,7% não eram castrados, 50,3% eram criados como semi-domiciliados, 86,9% tinham acesso à rua e 83,9% tinham contato com outros animais, por serem criados em conjunto ou por saírem à rua. Das notificações avaliadas nas residências, cerca de 50% foram confirmadas. Os Distritos Sanitários com maior número de casos confirmados nos dois anos foram Boca do Rio, Itapuã, Cabula/Beirú e Subúrbio Ferroviário. Com relação aos casos humanos, observou-se um aumento de 80,6% dos casos entre 2018 e 2019, sendo que mais de 70% das ocorrências foram em mulheres, maiores de 50 anos. No ano de 2018, 51,6% dos casos humanos ocorreram na área de influência das residências com felinos positivos (até 1 Km de raio) e em 2019 esse percentual passou para 82,1% dos registros. Dentre as características avaliadas, gatos jovens e adultos apresentaram maior chance de confirmação do diagnóstico de esporotricose. O contato com outros animais considerados como suspeitos de estarem com esporotricose aumentou a chance de confirmação do diagnóstico. Conclusão: Observou-se com esse trabalho, o aumento e espalhamento dos casos de esporotricose pelo território, além da descrição da população envolvida. As localidades de ocorrência, tanto em animais como humanos apresentaram características similares de deficiências de infraestrutura, além de grande adensamento populacional e hábitos de criação dos animais em comum. A adoção de medidas multidisciplinares visando a abordagem de “Saúde única” devem ser adotadas com agilidade. Palavras chaves: esporotricose, Sporothrix, micose, Distrito Sanitário, Saúde Única.

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Autoria: Caroline G. da Rocha
Orientação: Marilda de Souza Gonçalves
Título da dissertação: “Leucemia promielocítica aguda: uma revisão do cenário brasileiro”
Programa: Pós-Graduação em Patologia
Data de defesa: 21/12/2021
Horário: 09h00
Local: Sala virtual do Zoom

RESUMO

INTRODUÇÃO: a leucemia promielocítica (LPA) é um dos subtipos mais graves de leucemia mieloide aguda cujos avanços recentes na terapêutica permitiu alcançar altas taxas de sobrevida na doença, tornando-a um dos subtipos de leucemia com os melhores prognósticos. Apesar da LPA ser comumente conhecida como uma doença rara, atingindo cerca de 10% das LMA, dados recentes mostram prevalência alta da doença em latino-americanos, assim como em brasileiros. Além disso, as taxas baixas de sobrevida e de mortalidade elevada no Brasil são alarmantes para o caráter curável da doença. A descrição, delineamento e exploração dos dados brasileiros são necessários para conhecer o cenário da LPA no país. OBJETIVO: com a presente revisão sistemática, apresentamos o delineamento do cenário atual da leucemia promielocítica no Brasil a partir dos dados disponíveis na literatura, assim como possíveis hipóteses para esse cenário. METODOLOGIA: a busca sistemática foi realizada nas plataformas PubMed, Embase, Web of Science e LILACS. Foram coletados dados referentes a prevalência da LPA, assim como dados sociodemográficos, clínicos e laboratoriais de pacientes brasileiros. Dados referentes a evolução clínica como taxas de sobrevida e óbitos também foram coletados. RESULTADOS: Sessenta e quatro artigos foram selecionados. A prevalência da LPA foi fornecida por 46 estudos brasileiros e variou de 0% a 40%. A idade dos indivíduos no geral varia na faixa dos 10 aos 80 anos, porém há casos fora dessa faixa. A distribuição é semelhante entre os sexos, embora a maioria dos estudos apresente prevalência maior no sexo feminino. A frequência da M3v varia de 0% a 43,7% em brasileiros e a maioria dos brasileiros com LPA estão no grupo de risco intermediário ou alto de recidiva. As principais manifestações da doença reportados foram presença de coagulopatias (37,5%-72,8%), sangramentos (17,2%-90,9%), equimose (90,9%-92%) e febre (27%-31%). As alterações laboratoriais são características do quadro clássico de leucemia aguda, porém com leucocitose e plaquetopenia extremamente acentuada em alguns casos. A presença da t(15;17) varia de 84,6% a 100% dos indivíduos, enquanto a frequência do PML-RARα varia entre 74,7%-100%. Nove casos brasileiros de mutações variantes associados a LPA foram encontrados na literatura. A maioria dos estudos apresenta sobrevida global de 5 anos abaixo de 70% e a maior parte das mortes são precoces. CONCLUSÃO: Os dados dos estudos nacionais apontam para um cenário preocupante da LPA no Brasil. Acreditamos que este cenário sugere uma possível negligência no atendimento básico de saúde aos pacientes, com diagnóstico tardio e automedicação que pode ser melhorado com ações organizadas, que contribuam para o desenvolvimento de normativas nacionais, e com o comprometimento da comunidade médico-científica e o Ministério da Saúde.
Palavras-chave: Leucemia promielocítica aguda, leucemia mieloide aguda, revisão sistemática, Brasil.

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Autoria: Marina Faillace de Amorim
Orientação: Patrícia Sampaio Tavares Veras
Título da dissertação: “Desenvolvimento da formulação contendo o fármaco 17-DMAG impregnado em membrana de celulose bacteriana para compor esquema terapêutico contra leishmaniose cutânea”
Programa: Pós-Graduação em Patologia
Data de defesa: 16/12/2021
Horário: 09h00
Local: Sala virtual do Zoom

RESUMO

A leishmaniose é uma doença tropical negligenciada, endêmica em mais de 90 países e, no Brasil está presente em todas as regiões, sendo considerada um problema de saúde pública. As manifestações clínicas variam entre formas cutâneas, que apesar de não serem fatais causam estigma social, e a visceral que, por sua vez, pode ser fatal. Sua transmissão ocorre por meio da picada de flebotomíneos fêmeas que, durante o repasto sanguíneo, inoculam promastigotas de Leishmania presentes em sua saliva. As promastigotas, então, infectam as células hospedeiras e se diferenciam na forma amastigota. Os tratamentos atuais mais utilizados são os antimoniais pentavalentes, além da Anfotericina B, pentamidina, paramomicina e miltefosina, porém, limitações como efeitos colaterais, aplicação invasiva, longos ciclos de tratamento, falha terapêutica ou alto custo levam o abandono do tratamento. Esses dados mostram a necessidade do desenvolvimento de novas drogas leishmanicidas. Neste cenário, a Hsp90 é uma chaperona envolvida no processo de estabilização e ativação de diversas proteínas cliente e é importante para a manutenção da homeostase celular. Em estudos anteriores, demonstramos que inibidores da Hsp90 são eficazes no controle de infecções causadas por Leishmania spp. em modelos in vitro e in vivo, chegando a zerar a carga parasitária e a reduzir citocinas pró-inflamatórias em camundongos BALB/c. No entanto, o uso prolongado in vivo, causou toxicidade. Desta forma, decidimos desenvolver uma formulação tópica, que por ser menos invasivo, hipotetizamos ser capaz de diminuir os efeitos tóxicos, ser de fácil aplicação, além de apresentar redução de custos. Assim, desenvolvemos formulações contendo 17-DMAG impregnado em membranas de celulose bacteriana (MCB), que é um biopolímero com propriedades curativas. O objetivo deste estudo foi avaliar o potencial quimioterápico do 17-DMAG, um inibidor da Hsp90, impregnado em MCB no tratamento da leishmaniose cutânea (LC) em modelos in vivo e in vitro de infecção por Leishmania braziliensis. Após diferentes testes, a impregnação das MCB seguiu as seguintes etapas: primeiramente as membranas foram cortadas com diâmetro de 3,5 cm, impregnadas com diferentes concentrações de 17-DMAG diluído em trealose 5% e secas em liofilizador. Para utilização nos ensaios, as MCB foram cortadas com punch de biópsia de 3 mm para os ensaios in vitro e de 8 mm para ensaios in vivo. Avaliamos a toxicidade das MCB sobre BMMΦ (CC50) e sua eficácia in vitro contra promastigotas axênicas de L. braziliensis (IC50). Após 72 horas de tratamento, foi obtido um valor de CC50 de 30,76 ± 1,29 nM, e IC50 de 159,9 ± 49,6 nM. Devido ao valor do IC50 ser menor do que o do CC50, não conseguimos calcular o valor do IC50 para índice de seletividade. A faixa de concentração usada para determinar o IC50 não causou toxicidade aos macrófagos, porém não teve efeito sobre as amastigotas intracelulares. Nos ensaios in vivo as concentrações de 311 e 155 µg/cm2 apresentaram toxicidade local com duas semanas de tratamento, mas não apresentaram toxicidade sistêmica. Concentrações menores, entre 1.000 e 125 ng/cm2 não apresentaram toxicidade local, sendo viáveis para ensaios de toxicidade in vivo. Estes dados, somados aos resultados anteriores com a droga livre, demonstram que, após ajustes de doses, 17-DMAG terá potencial para compor esquema terapêutico contra LC.

Palavras chave: Leishmaniose, Tratamento tópico, 17-DMAG, HSP90, Membrana de celulose bacteriana

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Autoria: Gustavo Marinho Miranda
Orientação: Jaime Ribeiro Filho
Título da dissertação: “Caracterização do perfil bioquímico, hematológico e inflamatório em camundongos falciformes: correlações com o metabolismo lipídico e produção de eicosanoides em modelo de úlcera cutânea”
Programa: Pós-Graduação em Patologia
Data de defesa: 16/12/2021
Horário: 09h00
Local: Sala virtual do Zoom

RESUMO

INTRODUÇÃO: A Anemia Falciforme é uma hemoglobinopatia autossômica recessiva, caracterizada pela mutação na sexta posição do gene da β-globina (GAG → GTG) que leva à substituição do ácido glutâmico por valina, gerando a hemoglobina S (HbS). Sua patogênese está relacionada com a polimerização da HbS, vaso-oclusão e inflamação estéril com posteriores complicações e alterações sistêmicas. As úlceras falciformes são complicações que afetam 8% a 10% dos pacientes com AF. Nesse contexto, embora seja estabelecido que a úlcera falciforme tanto resulte da predisposição dos pacientes, como induza processos inflamatórios, os mecanismos envolvidos, em particular, a participação dos mediadores lipídicos, permanecem por ser melhor investigados. OBJETIVO: Caracterizar o perfil hematológico, bioquímico e inflamatório de camundongos humanizados para anemia falciforme e avaliar as alterações locais e sistêmicas induzidas pela úlcera cutânea nestes animais. MATERIAIS E MÉTODOS: Após anestesia, amostras de sangue total, soro, órgãos e fragmentos de pele de camundongos da linhagem Townes B6:129 foram coletados a fim de determinar as diferenças basais em parâmetros bioquímicos, hematológicos e inflamatórios de camundongos sadios (AA), com traço falciforme (AS) e com anemia falciforme (SS). No modelo murino de úlcera falciforme, quatro lesões cutâneas de 4 mm foram induzidas no dorso dos animais, e amostras destas lesões foram coletadas nos tempos de 0, 24 e 72h após a indução das úlceras. Nestes mesmos períodos de avaliação, amostras de sangue total foram destinadas à análise de hemograma e leucograma por análise semiautomatizada, utilizando equipamento URIT 5160 Vet e esfregaços sanguíneos corados com Romanowsky. Análises bioquímicas de colesterol total (CT), triglicerídeos, AST, ALT, ureia e creatinina realizada no soro, por espectrofotometria por método automatizado no equipamento Smart Vet 200+. As concentrações de PGE2 e LTB4 no soro foram avaliados por ELISA. A expressão de genes associados à produção de eicosanoides tais como COX-1, COX2, 5-LO, PLA2 e PLIN2 nas lesões cutâneas foram determinadas por RT-qPCR. Análises histológicas do infiltrado inflamatório foram realizadas por microscopia em lâminas coradas por H&E, utilizando o programa Imaje J 1.53. As diferenças entre os grupos e respectivos tempos foram avaliadas por pelos testes One-way ANOVA, Mann-Whitney e Kruskal-Wallis, utilizando o programa Graphpad Prism 8.0.2. RESULTADOS: A caracterização dos parâmetros basais mostrou que animais SS apresentaram anemia hemolítica grave e leucocitose, enquanto o grupo AS se assemelhou ao controle. Níveis elevados de AST foram observados nos grupos AS e SS em comparação ao grupo AA, enquanto ALT do grupo SS estava elevada em comparação com os grupos AA e AS, e os níveis de creatinina do grupo SS foram significativamente maiores que o grupo AA. No grupo SS a concentração sérica de PGE2 se mostrou elevada enquanto os níveis de LTB4 estavam diminuídos em comparação com os animais do grupo AA e AS. Correlações negativas entre hemoglobina, hemácias, hematócrito e PGE2 foram observadas. As alterações induzidas pela úlcera no hemograma do grupo SS não foram significantes. No entanto, houve redução dos leucócitos totais em 24h e aumento em 72h nesse grupo. Em contrapartida, o infiltrado leucocitário tecidual apresentou aumento em 24h e leve redução em 72h. No grupo SS em 24h, houve redução de CT e de AST. Já em 72h, observamos aumento do CT e redução de ALT e creatinina no mesmo grupo. Ainda no grupo SS, o perfil de expressão da COX-2 no tecido aumentou em 72h, enquanto a PGE2 e LTB4 sistêmicos não apresentaram alterações significativas. CONCLUSÃO: Animais transgênicos com anemia falciforme apresentam alterações bioquímicas e hematológicas que estão correlacionadas a um desbalanço no metabolismo lipídico e produção de eicosanoides, contribuindo para um maior estado inflamatório em nível basal. A indução de úlcera cutânea neste modelo leva a um maior recrutamento de leucócitos nos animais doentes em comparação com os animais saudáveis e com traço falciforme, o que parece estar relacionado com as alterações bioquímicas, hematológicas e inflamatórias apresentadas por estes animais. Palavras-chave: Camundongos transgênicos; Doença falciforme; Eicosanoides; Inflamação; Úlcera cutânea.

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Autoria: Ronald Alves dos Santos
Orientação: Ricardo Riccio Oliveira
Título da dissertação: “Avaliação do padrão de resposta do teste rápido em urina para o diagnóstico da esquistossomose, POC-CCA, em uma população de elevada endemicidade no Estado da Bahia”
Programa: Pós-Graduação em Patologia
Data de defesa: 17/12/2021
Horário: 14h00
Local: Sala virtual do Zoom

RESUMO

INTRODUÇÃO: A esquistossomose é uma doença negligenciada causada por helmintos do gênero Schistosoma, e reconhecida como um importante problema de saúde pública que afeta especialmente as comunidades mais pobres ao redor do mundo. A esquistossomose possui uma ampla distribuição ao redor do mundo, porém, está restrita apenas às zonas tropical e subtropical, onde vivem os parasitos e seus hospedeiros intermediários, fator esse que influencia diretamente na distribuição global da doença. Segundo a Organização Mundial da Saúde (OMS) as pessoas mais suscetíveis a contrair a esquistossomose são as que habitam áreas carentes, cuja fonte de renda principal seja a pesca ou a agricultura em rios e lagos com caramujos infectados. O diagóstico atualmente é realizado por exame parasitológico de fezes, pelo método Kato-Katz, o que representa uma limitação dos estudos e inquéritos parasitológicos, considerando o cenário epidemiológico atual do Brasil. Alguns testes diagnósticos estão sendo propostos e avaliados em todos o mundo, dentre eles, destaca-se o teste rápido em urina POC-CCA. OBJETIVO: Determinar a frequência de positividade do teste rápido em urina para o diagnóstico da esquistossomose, POC-CCA, em uma população de alta prevalência no estado da Bahia, antes e após o tratamento da esquistossomose. METODOLOGIA: Trata-se de uma coorte realizada no município de Conde-BA, localizado a cerca de 170 km de Salvador-BA. Foram incluídos indivíduos de ambos os sexos com idade entre 4 e 70 anos que entregaram amostras de fezes e urina. As amostras de fezes foram utilizadas para a confecção de duas lâminas de Kato-Katz, e as de urina para a execução do POC-CCA e tira reagente de urina. Para as análises do póstratamento, todos os indivíduos que receberam o tratamento para a esquistossomose e enviaram amostras de fezes e urina foram incluídos. O acompanhamento foi realizado em cinco momentos: avaliação pré-tratamento (D0), tratamento (D30), controle de cura (D30), acompanhamento 180 (D180) e 360 (D360) dias após tratamento. RESULTADOS: Foi identificada a presença de ovos de S. mansoni em 189 indivíduos (55,59%) com mediana da carga parasitária de 36 (12–108) ovos por grama de fezes (OPG). Para a avaliação do POCCCA das 273 amostras no D0, 58,24% (n=159) foram positivas para o Antígeno Catódico Circulante (CCA), destes, 18,32% (n=50) foram considerados falso-negativos; 19,05% (n=52) falso-positivos; 23,44% (n= 64) verdadeiro-negativos e 39,19% (n=107) verdadeiro-positivos. Demonstramos ainda que a densidade da urina é um fator que interfere no desempenho do OC-CCA, onde urinas com densidade mais elevada aumentar a chance de resultados falso negativos no POC-CCA CONCLUSÃO: O POC-CCA, apesar de apresentar uma frequência de resultados positivos maior do que a trazida por duas lâminas de Kato-Katz, apresenta um número considerado de falso-negativos, especialmente entre os indivíduos com baixa carga parasitária. O POC-CCA mostrou as mesmas falhas que o Kato-Katz, no que diz respeito a sensibilidade em amostras com baixa carga parasitária, além disso, o método demonstrou sofrer influência da densidade urinária. Por essa razão a utilização em larga escala do POCCCA não pode ser recomendada em seu formato atual. É possível que a adequação do teste ou do estado do paciente, como a recomendação de hidratação do paciente antes da coleta de material, ou utilização de solução tampão durante a aplicação da amostra, possam auxiliar na melhoria de desempenho deste teste em regiões de alta endemicidade do Brasil.
PALAVRAS CHAVE: Schistosoma mansoni; Diagnóstico; POC-CCA.

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Autoria: Jamile Gomes Conceição
Orientação: Ramon dos Santos El-Bachá
Título da tese: Estudo da interação da fenilfluorona com aminoácidos da glicoproteína e do envelope do vírus Zika e seus efeitos em células in vitro
Programa: Pós-Graduação em Patologia Humana
Data de defesa: 30/11/2021
Horário: 14h00
Local: Sala virtual do Zoom

RESUMO

Zika é uma doença que se tornou um problema de saúde pública mundial. O vírus pertence a família Flavivírus, e possuem resíduos de arginina, lisina e cisteína que são altamente preservados na glicoproteína E. Catecóis ao se oxidarem geram quinonas e semiquinonas altamente reativas, que são capazes de se ligar a resíduos de arginina, lisina e cisteína de proteínas. Catecóis podem modificar covalentemente a estrutura de aminoácidos da glicoproteína E, alterá-los covalentemente e interferir na infectividade viral. OBJETIVO: Este trabalho investigou a modificação de aminoácidos da glicoproteína e do envelope do vírus Zika através da Fenilfluorona. METODOLOGIA: Foram analisados os locais de ligação da fenilfluorona com resíduos de aminoácidos da glicoproteína E in silico. Foi identificada a concentração não citotóxica da Fenilfluorona em linhagem de glioblastoma U-251 através de testes de viabilidade celular. Comparou-se a infectividade do vírus selvagem (não modificado com Fenilfluorona) com a do vírus modificado em cultura de células Vero pela formação de unidades formadoras de placas (PFU). Investigou-se a resposta imunológica por ELISA através da expressão de citocinas TNF,IL-8 e IL-10. RESULTADOS: Os resultados demonstraram que a fenilfluorona interage com a glicoproteína E do zika vírus. A fenilfluorona não apresenta citotoxicidade para células de glioblastoma U-251 em uma mediana de 49,9 µM. O vírus modificado com a fenilfluorona apresentaram redução da PFU em células Vero. Não houve alteração estatisticamente significativa de interleucinas IL-8, IL-10 e TNF nas células infectadas com o vírus modificado. CONCLUSÃO: Entende-se que a fenilfluorona interage com a glicoproteína E do vírus da Zika. Concentrações não tóxicas de Fenilfluorona não interferem na viabilidade de linhagens de células de glioblastomas U-251. Os vírus modificados com fenilfluorona tem sua infectividade reduzida em células Vero. Não há mudança na expressão de interleucinas. O vírus modificado não altera o perfil de expressão de das interleucinas IL-8 IL-8, IL-10 e TNF em glioblastomas.

Palavras-chave: células de glioblastoma, Zika vírus, Fenilfluorona.

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